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              人(CD73)ELISA試劑盒科研技術實驗

              發(fā)布時間:2019-10-16   點擊次數(shù):1258次

              人(CD73)ELISA試劑盒科研技術實驗規(guī)格:96T/48T
              品牌:仁捷生物
              特點:靈敏性高、特異性強、重復性好
              用途:科研實驗等領域科學研究,不得用于臨床診斷
              試劑盒種屬:羊、雞、鴨、魚、人、大鼠、小鼠、豚鼠、倉鼠、裸鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛等動植物。
              待檢樣本:體液、血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清液、尿液、組織勻漿、心房水標本等等。


              人(CD73)ELISA試劑盒科研技術實驗標本的采集及保存
              1.血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存  過程 中  如有沉淀形成,應再次離心。
              2.血漿:應根據(jù)標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
              3.尿液:用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
              4.細胞培養(yǎng)上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/ 分)。仔細收集上清。  檢測細胞內的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融,以 使細胞破壞并 放出細胞內成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
              5.組織標本:切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩吮救诨笕匀槐3?-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。

              人(CD73)ELISA試劑盒科研技術實驗操作步驟
              1.  從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
              2.  設置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;
              3.  樣本孔先加待測樣本10μL,再加樣本稀釋液40μL;空白孔不加。
              4.  除空白孔外,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
              5.  棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板5次(也可用洗板機洗板)。
              6.  每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
              7.  每孔加入終止液50μL,15min內,在450nm波長處測定各孔的OD值。

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